帖子主题: [经验分享] 【知识点】细菌培养基的组成成分  

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发表于:Mon Oct 08 15:49:36 CST 2018

 培养基的组成成分包括三大类:营养物质、凝固物质、抑制剂和指示剂。

  (一)营养物质

  尽管不同的细菌对营养的要求不同,但细菌需要的营养物质应含有水、氮源、碳源、无机盐类和生长因子等,常用的营养物质如下:

  1.蛋白胨:蛋白胨是制备培养基时最常用的成分之一,提供细菌生长繁殖所需要的氮源。是动物或植物蛋白质经酶或酸碱分解而成。植物胨和动物胨各有优点,配制培养基常将两者按一定比例混合使用,提高培养基的营养价值。蛋白胨易溶于水,遇酸不沉淀,不因受高温而凝固,并为两性电解质有缓冲作用。但吸水性强,应注意干燥密封保存。

  2.肉浸液:是用新鲜牛肉浸泡、煮沸而制成的肉汁。其中含有可溶性含氮浸出物(肌酸、黄嘌呤、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷酸、谷氨酸、甘氨酸等)和非含氮浸出物(肝糖、乳酸、琥珀酸、磷酸己糖、脂肪、无机盐类等)。还有一些生长因子。肉浸液可为细菌提供氮源和碳源,但肉浸液中所含氮物质过少而不能满足细菌的需要,因此在制备培养基时应再加入1%~2%的蛋白胨和0.5%氯化钠。

  3.牛肉膏:由肉浸液经长时间加热浓缩而制成。糖类在加热过程中被破坏,所以其营养价值低于肉浸液,但因无糖可用作肠道杆菌鉴别培养基的基础成分。由于使用方便,常用于制备培养基。

  4.糖类、醇类:为细菌生长提供碳源和能源。制备培养基所用的糖类、醇类有多种,常用的糖类有单糖(葡萄糖、阿拉伯糖等)、双糖(乳糖、蔗糖等)和多糖(淀粉、菊糖等);常用的醇类有甘露醇、卫茅醇等。除葡萄糖、蔗糖主要作为碳源和能源的基本成分外,其他糖类和醇类主要用于鉴定细菌所做的发酵反应。

  5.血液:血液中既含有蛋白质、多种氨基酸、糖类、无机盐类等营养物质,又能提供辅酶(如V因子)、血红素(X因子)等特殊生长因子,所以培养基中加入血液用于培养营养要求较高的细菌。另外,还可根据细菌在血液培养基中的溶血现象而进行鉴定。

  6.无机盐类:提供细菌生长的各种元素,如:钾、钠、铁、镁、钙、磷、硫等。用于制备培养基的无机盐类有多种,其中最常用的有氯化钠和磷酸盐,前者对维持酶的活性、调节菌体内外的渗透压非常重要,后者是细菌良好的磷源,并在培养基中具有缓冲作用。

  7.鸡蛋和动物血清:虽然不是构成培养基的基本成分,但却是某些细菌生长所必需的营养物质,所以仅用于制备一些特殊的培养基,这些细菌直接从鸡蛋和动物血清中获取营养。如培养结核分枝杆菌的鸡医学教,育网整理蛋培养基和培养白喉杆菌的吕氏血清培养基等。

  8.生长因子:是细菌生长所必需的,但需要量很小。在制备培养基时,常在肝浸液、肉浸液、酵母浸液和含血液培养基中加入维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生长因子。

  (二)凝固物质

  制备固体培养基时,需要在液体中加入凝固物质。最常用的凝固物质为琼脂,特殊情况下也可用明胶、卵白蛋白、血清等。

  琼脂是从石花菜中提取出来的一种半乳糖胶,当温度达98℃以上时可溶于水,在45℃以下则凝固成凝胶状态,是一种理想的固体培养基赋形剂。因其不被细菌分解利用,故无营养作用。

  (三)抑制剂和指示剂

  在制备培养基时常加入抑制剂和指示剂,这些并不是细菌生长繁殖所必需的物质,而是由于选择、鉴定及判断结果的需要。

  1.抑制剂:抑制剂必须具有选择抑制作用,在制备培养基时加入一定种类的抑制剂,目的在于抑制非检出菌(非病原菌)的生长,以利于检出菌(病原菌)的生长。抑制剂的种类很多,可医学教,育网整理根据不同的目的选用不同的抑制剂。常用的有胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及一些染料和某些抗生素等。

  2.指示剂:在培养基中加入一定种类的指示剂,是为了便于观察细菌是否利用和分解培养基中的糖、醇类。常用的有酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国蓝等酸碱指示剂。美蓝常用作氧化还原指示剂。

 

 

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发表于:2018-10-08 19:35:00
感谢分享!

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